Electroforesis de DNA en gel de agarosa

Segunda práctica de laboratorio de biología molecular: Electroforesis de DNA en gel de agarosa. Con pasos complementarios como el análisis de espectrofotometría tanto del DNA del banano como el del humano. Aquí, algunas consideraciones finales:
- La porosidad del gel de agarosa depende de la concentración del mismo en la solución de buffer TE.
- Ya que el bromuro de etidio es un agente intercalante que interacciona con el ambiente hidrofóbico del DNA, fácilmente puede provocar mutaciones.
- Al no extraer completamente los trozos de banano esto ocasiona un cambio en la curva normal de absorbancia de ácidos nucleicos en una muestra de DNA del mismo, evidenciando que existe una contaminación.
- El DNA al poseer grupos fosfato cuenta con una carga negativa. Por lo tanto, al hacer la electroforesis debe tenerse en cuenta el tamaño y no la carga.
- Cuando se tiene una relación de absorbancia (260 /280) menor que 2 existe contaminación con proteínas y si es mayor con fenol, cloroformo o carbohidratos.
- Cuando se tiene una relación de absorbancia (260 /280) de aproximadamente 2 indica que contamos con una muestra pura.
- Luego de la electroforesis y observar a través de la luz UV, el DNA del banano muestra una mayor migración debido a que este tiene un menor tamaño.
- Si bien la absorbancia está relacionada a una concentración, no lo es como tal.
Producción:
Maria Belén Salazar Piedrahita
Alejandra Isaza López
Daniela Ortiz Támara
Narración: David Romero, músico y estudiante de comunicación y lenguajes audiovisuales, Universidad de Medellín.
Ingeniería biomédica
EIA - CES
Fuentes:
-Electroforesis de DNA: facultad.bayamo...
-Electroforesis de DNA: www.bioted.es/m...
-Electroforesis de proteinas: www.labespinosa...
-Buffer de carga: usuarios.multim...
-Electroforesis de proteinas: www.medmol.es/t...
-Bromuro de Etidio : es.scribd.com/d...
-Bromuro de Etidio y Electroforesis: www.uco.es/orga...
-Electroforesis de DNA: www.ivic.ve/eco...
-Electroforesis: batzerlab.lsu.e...
-Electroforesis de DNA: books.google.co...
-Genoma banano: news.bbc.co.uk/...

[@kevinjzl]

excelente video! me aclaro muchas dudas! me siento mas preparado para la expo de mañana

[@maddyortizachaya1040]

es muy interesante la técnica ya que son basadas en resolución superior al acetato y electroforesis varia según la pureza del gel de agarosa,todas aplicadas en inmunoquimica o biología molecular ,es muy útil para el entendimiento de la técnica y el porque de cada reactivo.

[@bellabitte]

Muy buen video. Me ha despejado muchas dudas, ¡mañana haré mi electroforesis por fin!

[@canela1604]

excelente vudeo y mucho mejor la explicacion.

[@stalynortega6730]

un video muy buenooo... me pude sacar las dudas que tenia gracias :D

[@jonashelifloresperalta9326]

muy buen video , gracias

[@gracielaesthergonzalesbarr1631]

gracias

[@gawayne1374]

Gracias!

[@BelArtist]

¡Qué bueno saberlo, Kevin! Muchas gracias. :)

[@joaquindel7758]

Lindo el video!lo unico q no me quedo claro es la cantidad de Br.Et. q se debe usar y donde lo agregas?es al TBE??

[@cristobalcastrobustamante3819]

si

[@ranjanabhargava9666]

Can we get english version

[@kotoamatsukami1]

Deberias explicar de forma mas detalla el proceso que se ve en el video porque parece hablas de conceptos genereales

[@myrianhernandez6619]

ELECTROFORESIS

[@xayz999]

una duda tengo problemas con la electroforesis.... es sobre adn bacteriano pero al parecer no me esta dando nada al verse en uv

[@rafaelvaldiviamanrique6141]

Prueba con Serva Stain G o cambia el bulbo UV, Tal vez necesites mas concentracion de la muestra, dejalo un par de ciclos mas en el PCR, usa la Tth thermofilus.

[@magalimaya3993]

Hola, yo también tengo el mismo problema con ADN, en la electroforesis, no logro observar nada.