Uso de la cámara de Neubauer
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- Опубліковано 20 вер 2023
- La cámara de Neubauer es un instrumento esencial para el laboratorio de histología y para cultivos celulares. Permite calcular la densidad de células en una solución. Por ejemplo, la concentración de glóbulos rojos en la sangre, o más típicamente la concentración de células en una solución de cultivo. Consiste en un portaobjetos grueso donde se han tallado 3 muescas profundas en forma de V que permite el llenado por capilaridad. Esas muescas dejan dos mesetas en las que se encuentra grabada una rejilla de 3 x 3 mm con distinto nivel de detalle. Por fuera de las muescas hay dos barras que presentan una elevación de 100 micrómetros sobre las mesetas. Al colocar un cubreobjetos, quedarán siempre 100 micras de altura en la cámara, y con ayuda de las rejillas grabadas en las mesetas podemos calcular la superficie y, por tanto, el volumen final que estamos considerando.
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Hola Profesor, disculpe, estuvo viendo que hay "láminas cubre cámara de Neubauer", ¿es indispensible utilizar estos cubreobetos o un cubreobjetos normal sirve igual de bien? y una pregunta más ¿Si voy a usar un colorante en la visualización recomienda lavar con alcohol o solo con agua?
Mil gracias por el vídeo
Hola, un cubreobjeto normal es perfectamente válido. Los cubreobjetos normales son lo bastante rígidos como para alterar poco la medida (ya de por sí, imprecisa). La única precaución es que sean del tamaño adecuado (los cuadrados de 24x24 mm, van bien).
Los colorantes aplicados a las células en solución son hidrosolubles (por ejemplo, trypan blue), así que el alcohol no haría falta, pero si lo quieres usar (por ejemplo por desinfectar) no veo inconveniente. Lo que no hay que hacer nunca es frotar. En caso de que se haya secado y haya que tomar medidas más drásticas, un ligero sonicado en baño debería ser suficiente. Si no hay sonicador, dejarlo a remojo en agua jabonosa una noche y enjuagar abundantemente debería ser suficiente.
Un saludo
EL LIQUIDO TIENE QUE CUBRIR TODO EL CUBREOBJETO HASTA LO HUNDIDO EN LA LINEA,NO VI MUY BIEN,O SOLO SE COLOCA EN LA PARTE DEL MEDIO, CUANTO DEBO COLOCAR.
El líquido entra por capilaridad y rellenas las dos mesetas en cuanto las toca (fíjate de 3:04 a 3:06 en alta resolución y a cámara lenta y verás como se llena). Una vez lo haga, no hace falta añadir más. Nunca llenar las hendiduras completamente o el cubreobjetos podría flotar y habría más de 100 micras. Fíjate en 7:52 como todavía queda aire por llenar. Es más fácil de hacer, que de explicar. Sobre 250 microlitros debe ser suficiente.